Группа исследователей из Нидерландов опубликовала на biorxiv.org препринт, в котором утверждается, что найдено первое моноклональное антитело, блокирующее коронавирусы SARS-CoV-2 и SARS-CoV. Открытие может использоваться для разработки лекарства против COVID-19.
Биологи из Медицинского центра Эразмус (структурного подразделения университета Эразма в Роттердаме) и Утрехтского университета разработали антитела для борьбы с коронавирусом, вызвавшим эпидемию COVID-19. Согласно их утверждениям, они нашли моноклональное антитело, которое нейтрализует как SARS-CoV-2, так и SARS-CoV (вирус атипичной пневмонии 2002 года). Для этого они использовали антитела, полученные в прошлые годы для борьбы с другими видами коронавирусов, последовательно испытывая их на сродство к новому вирусу. Статья группы из 10 специалистов пока находится на рассмотрении в журнале Nature и доступна в виде препринта на biorxiv.org.
По словам ведущего автора Франка Гросфельда (Frank Grosveld) в интервью сайту университета Эразма erasmusmagazine.nl, пятнадцать лет назад он начал исследования возможности выращивания антител для человека в организме лабораторных мышей. Результаты получились обнадёживающими, так, что на базе Медицинского Центра университета Эразма (Erasmus MC) и нескольких других институтов была создана научно-производственная компания (Harbor Antibodies BV). В частности, она занималась производством антител для лечения опухолей. Во время нескольких вспышек коронавирусных инфекций она также разрабатывала антитела для них.
S-белок коронавируса прикрепляется к рецептору клетки. Изображение: National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health.
Антитела, нейтрализующие коронавирусы, обычно реагируют на их шиповидные белки (тримерные гликопротеины, или S-белки, видимые как характерные отростки «короны» на всех изображениях вируса). При помощи S-белков вирусы «прикрепляются» к трансмембранным рецепторам клетки; в данном случае мишень называется ACE-2, или «ангиотензинпревращающий фермент 2», и механизм «цепляния» к ней у нового коронавируса идентичен механизму, вызывающему SARS (эпидемия атипичной пневмонии 2002 года). Шиповидные белки обоих вирусов, SARS-CoV-2 и SARS-CoV, также похожи структурно и очень близки (77,5 % сходства) по своим последовательностям аминокислот.
По результатам этого цикла исследований в распоряжении лаборатории осталась коллекция из 51 вида содержащих соответствующие антитела клеточных линий («гибридомы»), реагировавших на предыдущую версию опасного для человека коронавируса, то есть SARS-CoV. После вспышки новой эпидемии все эти образцы были расконсервированы и исследованы на возможность реагирования на новый вирус. Четыре из антител по результатам иммуноферментного анализа (ELISA) реагировали на новый тип вируса, а одно из них, с обозначением 47D11, судя по результатам испытаний, оказалось способным подавлять оба клона, действуя одинаковым образом на шиповидный белок вирусов SARS-CoV и SARS-CoV-2. Это открытие, подкрепляемое 20 страницами дополнительных материалов, и составило основу рассматриваемой сейчас в Nature статьи. Согласно общим этическим принципам, до прохождения первого раунда рецензирования исследователи и их учебное заведение не могут выступать с заявлением для прессы, хотя рассказывать о своих разработках в формате интервью на странице университета, разумеется, не запрещается. Только после принятия статьи к публикации следует ожидать соответствующих релизов, которые разойдутся значительно шире.
Здесь речь идёт не о вакцине, а о лекарстве, потенциально способном остановить развитие заболевания. Вакцина обычно содержит белок, так или иначе связанный с вирусом (ослабленный штамм или инактивированный вирус), который, попав в организм, приводит к зарождению «клеток памяти», или B-лимфоцитов, генерирующих соответствующие антитела. Лекарство, наоборот, само поставляет антитела (в данном случае иммуноглобулин типа IgG1) для нейтрализации вируса, и сможет поддерживать приемлемый уровень защиты какое-то время, например дни или недели, до выздоровления. По словам Ф. Гросфельда, разработка вакцины заняла бы около двух лет, тогда как лекарство, использующее открытые антитела, могло бы появиться раньше.
Иммуноглобулин 47D11 (антитело; подсветка флуоресцентным красителем DAPI) связывается в GFP-меченых клетках (с зелёным флуоресцентным белком) с шиповым белком двух коронавирусов. Третий вирус, MERS, на который антитело заведомо не действует, используется для негативного контроля (принцип плацебо). Из статьи F.Grosveld et al.
Что удалось сделать в итоге, когда будет лекарство, и что напишут в новостях?
На языке протокола клинических исследований результаты нидерландских биологов — это нулевая стадия доклинических испытаний: исследования проводятся in vitro («в пробирке») или на лабораторных животных. Здесь даже нет лекарства/вакцины — проверяется принцип действия потенциального активного вещества в будущем лекарстве и определяется, стоит ли продолжать возиться с ним вообще. Дальше предлагаемый медицинский препарат (которого пока нет) проходит клинические испытания, которые разделяются на несколько фаз. Даже самая первая фаза предполагает участие нескольких десятков испытуемых, и на этом этапе определяется всего лишь то, можно ли этот препарат вообще вводить человеку (токсичность и переносимость): об эффективности речь не идёт. И здесь отсеивается около 90 % кандидатов. Только на второй фазе, в которой испытуемых несколько сотен, можно ставить вопрос об эффективности нового лекарства. Но «настоящие» испытания, после которых очередные чудесные пилюли могут получить статус лекарства и шансы быть включёнными в клинические протоколы — это третья фаза, рандомизированные контролируемые мультицентровые испытания, в которых количество испытуемых может измеряться тысячами.
Как следует из самой статьи, и из интервью ведущего автора, о лекарстве пока речи нет — предложены только сами антитела, которые остались после исследовательской работы с предыдущими опасными разновидностями коронавируса. Программа-минимум — это использование этих антител для разработки тестов на обнаружение антигенов. Даже если фармацевтическая компания сможет взять эту разработку на вооружение и вывести уже на её основе лекарственный препарат, для выхода на уровень лекарства потребуется несколько лет, когда этот штамм вируса, возможно, будет неактуальным.
И самое главное: от «перспективной разработки», даже заканчивающейся публикацией результатов в журнале уровня Nature или Science, до вменяемого уровня доказательной медицины (A или B) доживает около 1 % таких препаратов.
На такой же начальной стадии находится несколько подобных исследований, которые подавались в новостях как «разработанные вакцины/лекарства от коронавируса». На специальной странице есть сводная информация по препаратам, которые в настоящий момент проходят клинические испытания разных стадий. На время написания этой заметки там было заявлено две вакцины непосредственно от SARS-CoV-2, от компаний Moderna, Inc. и Inovio Pharmaceuticals, обе — на нулевой (доклинической) стадии, и ещё несколько препаратов, относящихся к другим опасным для человека видам коронавирусов, то есть SARS-CoV и MERS-CoV. Также в сети есть новости о ещё нескольких вакцинах-кандидатах вне этого списка, например, эта от китайских вирусологов. Скорее всего, до клинического применения им всем далеко.
В интервью сайту университета Эразма высказано заявление, что иммуноглобулин 47D11 — чуть ли не первое созданное антитело, именно блокирующее новый коронавирус. Беглый поиск на antibodies-online.com выдаёт не менее десяти препаратов, обозначенных как антитела к SARS-CoV-2, с разным принципом действия (то есть реагирующие на разные белки вируса, включая и его «шип») и доступных по ценам порядка 400 евро за 0,1 мг. Все они помечены как «предназначенные только для исследовательских целей», по-видимому, их назначение — выявление белков вируса в лабораторных экспериментах, и уж никак не лекарство. Специалисты могут сами оценить научную новизну проделанной работы по доступным материалам; в любом случае, более подробную информацию мы получим после приёма статьи к публикации и реакции научной общественности.
Источник: